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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)該分幾組？如何分組？你都做對(duì)了嗎？ 已有1人參與
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在探索新的醫(yī)療方法時(shí)，研究者們總會(huì)以實(shí)驗(yàn)室中的臨床前研究作為開端。在實(shí)驗(yàn)室中，通過(guò)動(dòng)物進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要，研究者們通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)了解藥物安全性和有效性的基本信息，它的結(jié)果也直接決定著試驗(yàn)藥物是否可以進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。 進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，常常需要把選擇的動(dòng)物按需要分成若干組。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的一個(gè)非常重要環(huán)節(jié)，美國(guó)動(dòng)物委員會(huì)要求投稿時(shí)，需要對(duì)動(dòng)物基本信息包括動(dòng)物來(lái)源、品系、生活環(huán)境、分組方法等作出說(shuō)明。然而大多數(shù)發(fā)表的文章，都未描述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分組方法，而被編輯索要原始數(shù)據(jù)來(lái)證明數(shù)據(jù)的可靠性�？梢�，分組十分重要。 對(duì)于實(shí)驗(yàn)技術(shù)，我們可以在具體操作中慢慢練，但是動(dòng)物分組如果最開始錯(cuò)了，直接就影響到最后結(jié)果的可信性，并且一旦實(shí)驗(yàn)研究開始，后期很難彌補(bǔ)，所以我們?cè)趯?shí)驗(yàn)開始前一定要認(rèn)真考慮這個(gè)問(wèn)題。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組時(shí)，我們常常碰到以下情況：該分幾個(gè)組合適呢？每只動(dòng)物腫瘤體積大小各異，又或者是性別和體重均不一，該如何分到各個(gè)組里面去呢？今天咱們就來(lái)聊一聊如何給動(dòng)物分組。 分幾組？ 研究目的是動(dòng)物分組的前提，其中對(duì)照組的設(shè)計(jì)尤其地重要。 為了保證能得到科學(xué)有效的數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組時(shí)應(yīng)特別注意建立對(duì)照組。對(duì)照組可分自身對(duì)照組和平行對(duì)照組。 1．自身對(duì)照組：用每個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理前和實(shí)驗(yàn)處理后的各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照，就分別是對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。用每個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自身對(duì)比，可排除個(gè)體間的差異。 2．平行對(duì)照組：分正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組（空白對(duì)照組）兩種。 正對(duì)照組是實(shí)施與實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物相同但排除了所要觀察的目的因子（如治療手段或藥物）的處理，負(fù)對(duì)照組則不作任何處理。 例如，要觀察某種藥物的藥效，對(duì)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物采用肌肉注射的給藥方法； 正對(duì)照組動(dòng)物同樣進(jìn)行肌肉注射，但注射的不是藥物而是同等劑量的生理鹽水，以便排除肌肉注射生理鹽水可能產(chǎn)生的影響； 負(fù)對(duì)照組動(dòng)物則不經(jīng)任何處理的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并與實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物和正對(duì)照組動(dòng)物在相同的環(huán)境和條件下飼養(yǎng)，作為空白對(duì)照。 當(dāng)然，還有一些其他的設(shè)立對(duì)照組的方法，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行設(shè)置。 —— 一般觀察一個(gè)藥物或者某種外界因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響需要設(shè)置3組對(duì)照——空白對(duì)照組（負(fù)對(duì)照組）、模型對(duì)照組（正對(duì)照組）和陽(yáng)性對(duì)照組。 空白對(duì)照組：指不經(jīng)任何處理的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，目的是為了突出正常動(dòng)物與疾病動(dòng)物之間的差別，來(lái)判斷造摸是否成功。 模型對(duì)照組：即疾病動(dòng)物模型，給予陰性（溶劑或賦形劑）處理，目的是與實(shí)驗(yàn)處理組相比，排除假陽(yáng)性結(jié)果。 陽(yáng)性對(duì)照組：通常是給予疾病模型動(dòng)物已知應(yīng)該有效的藥物或者其他有效因素的處理，目的是排除假陰性結(jié)果。 除了設(shè)置上述對(duì)照組外，還需加上處理因素那一組，一般設(shè)置劑量梯度，最好是設(shè)計(jì)3個(gè)以上，以形成劑量效應(yīng)。目的是為了考察藥物是否具有劑量依賴性，也是藥效的一種表現(xiàn)。 綜上，建議分組是： （1）空白對(duì)照組； （2）單純模型組 （3）模型對(duì)照組； （4）陽(yáng)性對(duì)照組（模型+陽(yáng)性藥物模型）； （5）模型+低劑量藥物； （6）模型+中劑量藥物； （7）模型+高劑量藥物。 注：并非每一個(gè)實(shí)驗(yàn)都能找到陽(yáng)性藥，因此，也不是每一個(gè)實(shí)驗(yàn)都需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組； 如何分？——隨機(jī)分配 確定了分幾個(gè)組，接下來(lái)，就講講怎么分？ 進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，統(tǒng)計(jì)學(xué)要求各實(shí)驗(yàn)組間除實(shí)驗(yàn)處理因素外，其它條件都完全相同，但事實(shí)上不可能完全做到，就是同一種動(dòng)物而言，即使品系、年齡、窩別、性別、生活條件完全一致，對(duì)藥物的反應(yīng)仍不可能完全一致，差異是絕對(duì)的，一致是相對(duì)的。 減少差異的辦法除精選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(或材料)外，就是實(shí)行嚴(yán)格的隨機(jī)原則進(jìn)行安排，使正性和負(fù)性影響隨機(jī)地分配到各組，得到平衡，而不受任何主觀愿望的影響。 因此，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組應(yīng)嚴(yán)格按照隨機(jī)分組的原則進(jìn)行，使每只動(dòng)物都有同等機(jī)會(huì)被分配到各個(gè)實(shí)驗(yàn)組中與對(duì)照組中去，盡量避免人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響，從而增加研究結(jié)論的可靠性。 隨機(jī)絕不是隨便，不是說(shuō)隨意指定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)該屬于哪個(gè)分組，這種辦法是根據(jù)研究者意愿分組，與隨機(jī)還是有非常大的差異。為避免人為因素，常需要利用隨機(jī)數(shù)字法以實(shí)現(xiàn)隨機(jī)分組。 根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、�?shí)驗(yàn)對(duì)象，常用的方法有：配對(duì)比較法隨機(jī)分組，完全隨機(jī)分組、隨機(jī)區(qū)組分組等。 01 配對(duì)比較法隨機(jī)分組 操作步驟：在分配動(dòng)物之前，先將動(dòng)物按性別、年齡、體重、胎別或其它有關(guān)因素加以配對(duì)，以基本相同的兩個(gè)動(dòng)物為一對(duì)配成若干對(duì)；然后，再將每一對(duì)動(dòng)物隨機(jī)分配于兩組中。 如，20只動(dòng)物分成A、B兩組，將動(dòng)物按如上所述方法分成十對(duì)，每對(duì)編號(hào)l、2，從隨機(jī)數(shù)字表連續(xù)抄錄十個(gè)數(shù)，奇數(shù)則該對(duì)第一只動(dòng)物入A組，第2只入B組；如為偶數(shù)，則該對(duì)第一只動(dòng)物入B組，第2只入A組。 優(yōu)點(diǎn)：兩組動(dòng)物的胎別、性別、年齡以及體重等根本情況也基本相同，從而盡可能減少兩組動(dòng)物的生物差異性。 適用范圍：在將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分成兩組時(shí)，適用。 02 完全隨機(jī)分組 操作步驟： （1）編號(hào)：將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從1到N編號(hào)，一般可以可按體重大小編號(hào)。打開Excel軟件，在“A1”單元格輸入“1”，用“Ctrl”鍵和填充柄在“A列”拖拽出所需的動(dòng)物號(hào)。 （2）獲取隨機(jī)數(shù)字：在“B1”單元格單擊"插入"菜單中選取“fx”,在對(duì)話框中選擇“rand”后“確定”，粘貼上第1個(gè)隨機(jī)號(hào)。用“填充柄”拖拽，使所有動(dòng)物均編上不同的隨機(jī)號(hào)，對(duì)已產(chǎn)生的隨機(jī)號(hào)用“復(fù)制”和“選擇性粘貼”“數(shù)值”加以固定。 （3）將隨機(jī)數(shù)排序：在“數(shù)據(jù)”菜單中選取“排序”，以B列隨機(jī)號(hào)“遞增”排序，將動(dòng)物號(hào)按附上的隨機(jī)號(hào)的順序由小到大重新排列。 （4）分組：然后按先后順序，依次分為1、2、3、4...等組。 優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單； 缺點(diǎn)：若動(dòng)物間有較大差異，如體重區(qū)間較大，則不適用這種方法。 適用范圍：所有動(dòng)物必須是“同質(zhì)”或者近似“同質(zhì)”。也就是說(shuō)所有的動(dòng)物性別、體重及其他相關(guān)因素（如荷瘤體積）是一樣的，或是近似的。 03 隨機(jī)區(qū)組分組 然而如果一批小鼠中，小的有18g的，大的有30g的，體重相差比較大，若按上述完全隨機(jī)方法分配到各組，很可能有的組分到體重特別大的，有的組分到特別小的，這樣難以保證平均分配。這時(shí)，則可采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。 隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)：先將一定數(shù)目和比例的動(dòng)物分為幾個(gè)區(qū)組（一般＞3），如體重相近的動(dòng)物、性別一致的動(dòng)物等。區(qū)組的長(zhǎng)度最好為組數(shù)的2倍以上，太小易造成不隨機(jī)，如有4個(gè)組，則區(qū)組長(zhǎng)度最好選擇8以上。 舉例： 有40只SD大鼠，重量在180-220克之間，需要分為4組，即每組10只（甲乙丙丁），應(yīng)先將動(dòng)物按體重配成若干個(gè)區(qū)組，再把每區(qū)組動(dòng)物隨機(jī)分配各組。 （1）首先，進(jìn)行大鼠稱重，按順序排序； （2）分區(qū)組：嘗試可將這些大鼠按體重分為4個(gè)區(qū)組（假設(shè)180~190g/8只，190-200g/12只，200-210g/16只，210-220g/4只），即4窩，分區(qū)時(shí)每窩的數(shù)量至少大于4； （3）編號(hào)：依次對(duì)這4窩大鼠編號(hào)，第一窩1、2、3、4…8，以此類推，編號(hào)到40； （4）隨機(jī)分配區(qū)組1：將這8只隨機(jī)分配給4組，每組各2只，分組方法即采用上述|“完全隨機(jī)分組”方法分配到每個(gè)組； （5）隨機(jī)分配剩余3個(gè)區(qū)組，方法同上。 優(yōu)勢(shì)：區(qū)間分組將保證了實(shí)驗(yàn)組間的生物差異減到了最小，遵循了一致性原則與隨機(jī)性原則，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 備注：有時(shí)我們會(huì)碰到多個(gè)因素，則需要依次分區(qū)，如：40只體重差異較大的小鼠，雌雄不一，此時(shí)我們不能只按照體重區(qū)組分配，需要先把雌雄分開，然后各自按體重分組。 綜上可以看到，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組需要遵循對(duì)照和隨機(jī)的原則，這樣才可以保證數(shù)據(jù)更加具有科學(xué)性和統(tǒng)計(jì)意義。 |
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2樓2024-07-03 21:17:45
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