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銀環(huán)蛇咬傷致肌無力SD大鼠模型
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世界上現(xiàn)存蛇類大約有3000余種，其中毒蛇超過600種，致命性毒蛇近200種，分為18個科、大約450多個屬。蛇類主要分布于北緯67°到南緯40°的區(qū)域內(nèi)，其中種類和數(shù)量最多的分布在亞熱帶和熱帶地區(qū)。據(jù)報道，我國每年毒蛇咬傷事件可達10萬人次，因蛇咬傷致殘而喪失勞動能力者占25%～30%，各類蛇咬傷死亡率達5%～10%，嚴重威脅著人們的生命健康。今天我們一起梳理銀環(huán)蛇咬傷模型。 一、實驗動物 KM小鼠和SD大鼠。 二、實驗方案 1、銀環(huán)蛇毒的KM小鼠半數(shù)致死量（LD50）為0.09mg /kg，測定本實驗銀環(huán)蛇干毒KM小鼠LD50，根據(jù)公式換算為銀環(huán)蛇毒的SD大鼠LD50 ; 按銀環(huán)蛇毒的SD大鼠的LD50倍數(shù)，予SD大鼠皮下注射，建立銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型，確定模擬臨床的最佳銀環(huán)蛇干毒劑量。 按Lennon等的分級法將肌無力癥狀分為4級： 0級，沒有肯定肌無力表現(xiàn)； 1級，嘶咬無力，四肢力量較差，在光滑地面上前肢打滑，活動減少； 2級，明顯無力，休息時脊背呈隆起姿勢，頭尾下垂、前肢彎曲，動作不協(xié)調(diào)； 3級，嚴重?zé)o力表現(xiàn)，無嘶咬動作，肌肉震顫，呼吸困難，瀕死或死亡。 2、用低頻重復(fù)神經(jīng)電刺激檢測銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型的腓腸肌電改變; 解剖模型大鼠，觀察膈肌及腓腸肌病理改變。 實驗流程見圖1。 圖片 圖1 銀環(huán)蛇毒的KM小鼠LD50的測定 三、建立銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力的中毒動物模型 確定銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型的劑量 （1）銀環(huán)蛇毒最佳劑量是3倍SD大鼠LD50，為0.24mg /kg給 SD大鼠皮下注射已配置的銀環(huán)蛇毒溶液（濃度10μg /mL）。 SD大鼠于1.5h左右出現(xiàn)呼吸困難，2h左右出現(xiàn)張口呼吸，模擬臨床1～4h出現(xiàn)呼吸衰竭，用于早期救治銀環(huán)蛇干毒相關(guān)性早期肌無力的基礎(chǔ)研究。 （2）進行RNS檢查，SD 大鼠為給予0.24mg/kg銀環(huán)蛇毒注射的 SD大鼠，行RNS檢查，中毒后，可見肌電遞減改變。 （3）病理結(jié)果 高倍鏡（×200）下模型組膈肌及腓腸肌細胞腫脹、核排列紊亂。對照組的膈肌與腓腸肌細胞形態(tài)未見異常。 |
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