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科研戰(zhàn)神·王鐵蟲 (小有名氣)
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點(diǎn)亮模型第16期 | 博萊霉素致大鼠間質(zhì)性肺病模型的構(gòu)建
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肺間質(zhì)纖維化（pumlonary interstitial fibrosis）是一種慢性炎癥間質(zhì)性肺病，以肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在末端肺泡聚集，實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷、肺泡纖維化為特征。其病因及發(fā)病機(jī)理尚不清楚，5年生存率不超過(guò)50％，目前尚無(wú)特效的治療方法。因此進(jìn)一步研究其發(fā)病機(jī)制、尋找有效的治療方法，已成為許多國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠，雄性，6-8周齡，體重（200±20）g 2、造模方法 雄性Wistar大鼠用10%水合氯醛，4ml/Kg體質(zhì)量腹腔內(nèi)注射。待大鼠麻醉后，將其仰臥位固定在鼠板上，頭低位暴露聲門，水平插入16號(hào)靜脈套管針，到達(dá)咽喉部時(shí)，壓低針尾，插入氣管，拔出針芯。大鼠經(jīng)氣管內(nèi)一次性灌注博萊霉素藥液5mg/kg。注入后立即將大鼠直立旋轉(zhuǎn)，以便于液體均勻在肺內(nèi)散布，制成間質(zhì)性肺病模型。動(dòng)物清醒后隨意進(jìn)食，觀察28天。 3、觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法 1、大鼠一般情況觀察 每天觀察大鼠的活動(dòng)度、對(duì)外界反應(yīng)的靈敏度、大鼠的皮毛光澤、口唇鼻顏色、體重、飲食、呼吸、死傷等情況。 2、病理學(xué)觀察 大鼠用10%水合氯醛溶液（4ml/kg）進(jìn)行麻醉后，取新鮮右肺下葉組織200g，用PBS緩沖液對(duì)肺組織周圍的血液等污物進(jìn)行沖洗，經(jīng)10%中性福爾馬林48小時(shí)充分固定后，再通過(guò)梯度酒精進(jìn)行脫水，再通過(guò)二甲苯進(jìn)行透明，石蠟包埋，間斷4μm切片4張，常規(guī)HE染色，光鏡下觀察肺組織。 |
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