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大鼠高脂血癥模型的構(gòu)建
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高脂血癥是指由于脂肪代謝異常所導(dǎo)致的血漿中一種或多種脂質(zhì)高于正常水平的病癥，且近年來其發(fā)病率呈現(xiàn)增加趨勢。流行病學(xué)調(diào)查和研究表明，高脂血癥是導(dǎo)致人類心血管疾病的首要因素。 對于該病的研究進(jìn)程，無論是新藥的研究與開發(fā)，還是臨床的新興治療手段，皆離不開動物試驗(yàn) 的機(jī)制研究，因此最關(guān)鍵是建立理想的高脂血癥動物模型。 一、實(shí)驗(yàn)動物 健康雄性８周齡清潔級SD大鼠，體重180ｇ~220ｇ 二、飼料 基礎(chǔ)飼料60.8g+豬油15g+蛋黃粉10g+蔗糖10g+膽固醇2g+膽酸鈉2g+丙基硫氧嘧啶0.2g 三、造模方法 1、適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，一次性腹腔注射維生素D3 600000U/kg后，喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料60.8g+豬油15g+蛋黃粉10g+蔗糖10g+膽固醇2g+膽酸鈉2g+丙基硫氧嘧啶0.2g八周。 2、造模第３周末、第８周末從大鼠眼眶靜脈叢取血，全血樣本室溫放置1h，3000r/min離心10min，取上清液為樣品，采用ELISA法分別檢測TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平，檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。根據(jù)一系列標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD450nm值，通過計(jì)算并分別得到TC、TG、HDL-C、LDL-C的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖及其方程式，將樣品OD450nm值代入方程式，分別計(jì)算TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量。 四、討論 長期高脂血癥所致的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷是導(dǎo)致動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制之一，若一次性注射超生理劑量維生素D3可致大鼠動脈出現(xiàn)彌漫性的中膜鈣化，血管鈣水平明顯升高，彈性纖維因大 量鈣質(zhì)沉積而斷裂，動脈僵硬、順應(yīng)性降低而引發(fā)動脈硬化，而血管硬化也能加重高脂血癥的程度，兩者相互促進(jìn)。目前在高脂血癥大鼠模型的構(gòu)建中，鮮有將維生素D3作為成功建立高脂血癥模型的促進(jìn)因素之一，因此可以通過注射超生理劑量維生素D3來加速動脈粥樣硬化的進(jìn)程，從而提高血脂濃度，促進(jìn)高脂血癥大鼠模型的成功構(gòu)建。此造模方法顯示第3周末即成模型，并穩(wěn)定至第８周末，這提示維生素D3能夠有效縮短高脂血癥大鼠的造模周期，節(jié)約試驗(yàn)成本，且所造模型可以穩(wěn)定保持５周以上，能夠滿足大多數(shù)一般試驗(yàn)時(shí)間的要求。 |
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