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18317190548新蟲 (小有名氣)
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科研小白的裝 X 寶典？限制性內(nèi)切酶實(shí)驗(yàn)大盤點(diǎn)！
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限制性內(nèi)切酶不僅在分子克隆中有著廣泛應(yīng)用，還可以應(yīng)用于疫苗研發(fā)生產(chǎn)、基因測(cè)序、SNP 鑒定、ddPCR 等領(lǐng)域。在往期的內(nèi)容中，我們已經(jīng)介紹了什么是限制性內(nèi)切酶以及內(nèi)切酶的分類，本期就來(lái)為大家盤點(diǎn)一下在使用內(nèi)切酶過(guò)程中最容易出現(xiàn)的問(wèn)題以及解決方法 。 限制性內(nèi)切酶的名稱通常由其來(lái)源物種的分類決定，屬名首字母 + 種名前兩位字母 + 血清型/菌株 + 同菌株的多種限制酶流水號(hào)羅馬數(shù)字。 為了方便大家理解，咱們以 Hind III 為例： ▐ 問(wèn)題 1：酶切不完全 ▐ 問(wèn)題 2：酶切后 DNA 瓊脂糖凝膠電泳呈彌散狀 ▐ 問(wèn)題 3：膠中條帶與預(yù)期不符 ▐ 問(wèn)題 4：克隆很少或沒(méi)有 ▐ 問(wèn)題 5：假陽(yáng)性過(guò)多 限制性內(nèi)切酶在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用非常廣泛，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)遇到的問(wèn)題也多種多樣。 |
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