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生物新材料之-重組人血白蛋白(HSA)
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白蛋白作為血漿中含量最豐富的蛋白,是激素、脂類(lèi)和游離脂肪酸等物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)載體,又因其可以可逆地結(jié)合許多物質(zhì),被作為一種重要的原料被廣泛用于診斷試劑中。其功效如下: 1)作為穩(wěn)定劑。白蛋白是一種大分子穩(wěn)定蛋白,可結(jié)合抗體、抗原或酶后使得這些敏感組分在蛋白水解和變性條件下變得更穩(wěn)定。 2)作為封閉劑。白蛋白可作為免疫反應(yīng)中的抗非特異性固相干擾阻斷劑,用于封閉免疫反應(yīng)中的非特異結(jié)合位點(diǎn)。 3)作為載體蛋白。白蛋白結(jié)合的配體包括脂肪酸、陽(yáng)離子和中性洗滌劑、乙酰膽堿、抗壞血酸、青霉素、甲狀腺素、洋地黃素、激素、金屬離子、膽紅素、糖類(lèi)等。 4)作為緩沖劑/共混劑。白蛋白可作為一種良好的緩沖液組分,或作為共混試劑,將結(jié)合的組分釋放到反應(yīng)混合物中,并可從介質(zhì)中吸附雜質(zhì)。 5)作為血漿基質(zhì)。白蛋白在某些指標(biāo)檢測(cè)中,與PBS一起聯(lián)用模擬人血漿,配制標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液,確定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 白蛋白包括人血清白蛋白HSA和牛血清白蛋白BSA,其中人血清白蛋白又分天然人血白蛋白pHSA和重組人血清白蛋白rHSA。是不是所有的白蛋白都是優(yōu)質(zhì)的診斷試劑原料呢?當(dāng)然不是! 天然人血白蛋白pHSA是從人血漿經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法提取,并經(jīng)病毒滅活處理制成。人血白蛋白純度(SDS-PAGE檢測(cè))>95%,除白蛋白外,其中還有多種脂肪酸、脂類(lèi)、激素及生長(zhǎng)因子,且不同廠(chǎng)家不同批次的人血白蛋白存在較大批間差異,用于診斷試劑中,對(duì)某些指標(biāo)檢測(cè)會(huì)造成干擾,同時(shí)給診斷試劑成品帶來(lái)批次波動(dòng)性。還有很重要的一點(diǎn),人血白蛋白作為一種臨床緊缺藥品,不易大批量購(gòu)買(mǎi),經(jīng)常容易缺貨。 牛血清白蛋白BSA又稱(chēng)第五組分,通常是屠宰牛肉之后的附屬產(chǎn)品,也是通過(guò)乙醇沉淀法獲得。不同廠(chǎng)家不同地區(qū)出產(chǎn)的牛血清白蛋白品質(zhì)不同,且同一廠(chǎng)家的不同批次的產(chǎn)品品質(zhì)也差別較大。通常牛血清白蛋白的純度(SDS-PAGE檢測(cè))<95%,凍干粉顏色偏黃,氣味較重,激素及重金屬含量較高,用于診斷試劑可能會(huì)造成較大的干擾,并且極大的批間差會(huì)必然造成診斷試劑成品的品質(zhì)波動(dòng)。 |

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