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一文了解免疫組化(IHC)是什么?
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免疫組化(immunocytochemistry,IHC)可以用來確定組織細胞內(nèi)的抗原,對其進行定位、定性及相對定量的研究。免疫組化在病理診斷上的應(yīng)用是在上個世紀七十年代開始的,目前其在病理診斷中的應(yīng)用非常廣泛,其已是組織形態(tài)學研究中不可或缺的一部分。 免疫組化的原理 免疫組化的原理是依賴抗原和抗體之間的特異性結(jié)合標示靶點分子。先將組織細胞或細胞中的某一種化學物質(zhì)提取出來作為抗原,通過免疫動物后獲得特異性抗體,在以此抗體去探測組織或細胞中的同類抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體是透明無色的,故需要借助于組織化學的方法將抗原-抗體結(jié)合的部位顯現(xiàn)出來,以達到對組織或細胞中的未知抗原進行定位,定性及相對量的研究。 免疫組化的方法 采用免疫組化染色法,具體步驟為: 常規(guī)制備涂片制備 TBS緩沖液洗滌5min*3次 第一抗體,4℃冰箱過夜 TBS緩沖液洗滌,5min*3次 第二 抗體,37℃,30min TBS緩沖液洗滌,5min*3次。⑦ S-P復合物,37 ℃,30min TBS洗滌液洗滌,5min*3次 DAB顯色 流水洗滌 蘇木素復染,酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。結(jié)果判定:細胞膜、胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性(+);深棕色顆粒為強陽性(++);未顯色者為陰性(-) 圖片 |
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