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Jarnnney新蟲 (小有名氣)
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BSA封閉磁珠立馬出現(xiàn)聚沉
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我的磁珠和cdna在PBST中（PH7.4）37度偶聯(lián)4.5h,之后加入含1%BSA的PBST（PH7.4）封閉時 立馬聚沉，而且顏色由土黃色變成了鐵銹紅，這是為什么呢？ @liubin 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2023-10-07 15:37:40
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我試過PH6.0的條件偶聯(lián)后加入含BSA的PBST，依然是立刻出現(xiàn)沉淀。 哪怕是剛取出的磁珠母液加入封閉液也是立馬沉淀。這是為什么呢？ 而且我不論是在PH7.4還是6.0的體系，都偶聯(lián)不上適配體 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2023-10-08 13:34:43
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4樓2023-10-10 12:05:17
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5樓2023-10-10 12:07:25
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偶聯(lián)結束清洗了。 現(xiàn)在不是明顯的聚沉，就是從之前的那種融化的巧克力的絲滑感變成稍微沙沙的感覺，顏色也氧化變深棕紅。目前最大的問題是，磁珠偶聯(lián)不上適配體，而且偶聯(lián)液上清的吸光值不降反增，這是為什么呢？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
6樓2023-10-15 00:07:44
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-?EDC可能失活，建議嘗試新鮮配制的?EDC。 -?Sulfo-NHS中間體可能已經水解，EDC和SulfoNHS?需即配即用。 -?蛋白量不足，建議提高包被濃度 -?羧基活化后直接加入蛋白。 -?避免引入帶有氨基基團的蛋白及復合物引起競爭反應 -?調整包被緩沖液或?PH。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2023-10-15 10:06:10
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8樓2023-10-15 10:07:27
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Jarnnney9樓2023-10-15 10:09:33
Jarnnney
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10樓2023-11-03 00:39:04
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