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百事可愛(ài)66新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
質(zhì)粒載體和病毒載體有哪些異同?
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從理論上來(lái)說(shuō),載體的構(gòu)建沒(méi)有太大的技術(shù)難度,但是它的成功與否有時(shí)候是一個(gè)玄學(xué)的過(guò)程,有一定程度上的運(yùn)氣成分,有時(shí)候“胡亂”操作一通反而莫名其妙地構(gòu)上去而且轉(zhuǎn)化成功了。那么在具體的應(yīng)用中,質(zhì)粒載體和病毒載體有哪些異同? 01 進(jìn)入細(xì)胞方式不一樣 質(zhì)粒通過(guò)轉(zhuǎn)染進(jìn)入目的細(xì)胞,病毒通過(guò)感染進(jìn)入目的細(xì)胞,特異性更強(qiáng),且效率更高。 02 所搭載的序列形式及其發(fā)揮功能的方式可能不一樣 質(zhì)粒DNA所搭載的目的序列是DNA,并且DNA通常需要進(jìn)入細(xì)胞核才能行使相應(yīng)的功能;病毒載體搭載的序列可以是DNA,也可以是RNA,而RNA序列通常不需要入核行使功能,并且如果是進(jìn)行宿主基因組的同源重組,病毒載體效率更高。 03 包裝、提純方式不一樣 質(zhì)粒通常是在原核細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增后提純;病毒載體通常在真核細(xì)胞內(nèi)包裝后逐步擴(kuò)大培養(yǎng)后裂解細(xì)胞/收集上清后提純獲得。 04 保存方式不一樣 質(zhì)粒通常穩(wěn)定性非常好,對(duì)溫度不敏感; 病毒不一樣,一般需要低溫冷凍保存對(duì)溫度很敏感,反復(fù)凍融對(duì)活力影響也非常大。 05 在疫苗應(yīng)用不同 質(zhì)粒DNA作為DNA疫苗的載體,通常免疫原性較低,需要使用脂質(zhì)體或者電擊槍用于增強(qiáng)DNA進(jìn)入細(xì)胞; 病毒載體疫苗免疫原性較好,通常很容易誘導(dǎo)較強(qiáng)的抗體和T細(xì)胞免疫原性,但往往受限于預(yù)存免疫。 |
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