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免提取DNA直擴(kuò)方法與應(yīng)用心得 ----兼容SNP熒光終點(diǎn)法（Flu-ARMS或KASP），電泳PCR
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高通量提取DNA做PCR，SSR，SNP檢測(cè)如Flu-ARMS或KASP動(dòng)輒上千個(gè)樣品，用柱子提取花費(fèi)太高，離心耗時(shí)太多，通量上不去。磁珠法需要配合自動(dòng)提取儀，對(duì)設(shè)備要求高。目前絕大部分實(shí)驗(yàn)室還是使用傳統(tǒng)的CTAB法或者其相關(guān)簡(jiǎn)化版方法，只要用普通化學(xué)試劑，成本便宜，但需要酒精沉淀，烘干，操作還是略微需要一定時(shí)間。提DNA是必須的嗎？ 固德生物推出免提取DNA直擴(kuò)方法和直擴(kuò)裂解試劑，不用任何提取步驟，只需： 1. 取 2cm長(zhǎng)水稻葉片，在 96深孔板里，加 5mm鋼珠一顆，加 400ul直擴(kuò)裂解液； 2. 高通量研磨機(jī) 1400rpmX40S； 3. 吸取 10ul研磨液體至 90ul水中，混勻，直接上機(jī)（DNA在體系中加量常在 20%~50%， 推薦為 50%）。 以上步驟10分鐘內(nèi)就可以完成96*2份樣本處理。一天可以處理上近萬(wàn)份樣本，高效快捷。 無(wú)需提取DNA，從取樣到PCR結(jié)束，只需要一個(gè)小時(shí)， PCR結(jié)束無(wú)論是看SNP熒光分析還是SSR電泳跑膠都適用 試劑不含強(qiáng)堿裂解液，比堿煮法更柔和，通用性更強(qiáng)。 輕松完成水稻、玉米、小麥、擬南芥，農(nóng)桿菌，培養(yǎng)細(xì)胞，血液等樣本的大規(guī)模DNA提取 案例： PCR+熒光做SNP檢測(cè)：水稻葉片用直擴(kuò)裂解液研磨后上清稀釋15倍，配合固德生物Flu-ArmsTM SNP分子標(biāo)記檢測(cè)試劑，PCR后熒光掃描進(jìn)行基因分型 （此方法用普通PCR+熒光定量或掃描儀大規(guī)模做SNP分析，通量高，操作簡(jiǎn)單） PCR+電泳做SNP檢測(cè)：油菜葉片用直擴(kuò)裂解液研磨后上清稀釋15倍，配合固德生物PG-ArmsTM SNP分子標(biāo)記檢測(cè)試劑，PCR后做8%PAGE電泳進(jìn)行基因分型。（此方法用普通PCR+電泳設(shè)備就能大規(guī)模做SNP分析，不需要熒光定量PCR儀。適合SSR轉(zhuǎn)SNP方法。轉(zhuǎn)型簡(jiǎn)單，成本底） PCR+電泳做片段檢測(cè)：油菜葉片用直擴(kuò)裂解液研磨后上清稀釋10倍，PCR后做瓊脂糖電泳 |
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