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hlp0809新蟲 (小有名氣)
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[交流]
Crisp-cas9敲除 已有3人參與
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有沒(méi)有做過(guò)基因敲除的大佬,gibosn構(gòu)建好的左右500bp同源臂和N20質(zhì)粒,為什么后面誘導(dǎo)編輯失敗呢?敲除不成功需要注意那些事項(xiàng)呢? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
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大佬 我想問(wèn)問(wèn)我做cas9的時(shí)候,第一次預(yù)實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)cas9和重組酶表達(dá),轉(zhuǎn)化sgRNA質(zhì)粒后,重組子都是正確的,后面再重復(fù)的時(shí)候,全是假陽(yáng)性,有的長(zhǎng)的很多,有的長(zhǎng)的少; 不誘導(dǎo)cas9轉(zhuǎn)化sgRNA質(zhì)粒,預(yù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候克隆長(zhǎng)得很多一個(gè)板幾百個(gè)符合預(yù)期,但后面重復(fù)的時(shí)候就長(zhǎng)得很少四五個(gè)這樣子,但也都是假陽(yáng)性,sgRNA的質(zhì)粒就是第一次提出來(lái)的那些,是一樣的,這是什么情況呢 |
銅蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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