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C12ire1新蟲 (初入文壇)
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[求助]
雙酶切求助! 已有2人參與
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雙酶切后載體條帶很淺 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是載體和插入片段同時(shí)酶切過夜,用的EcoRI和BamHI,片段和載體都是50體系,且都加了500ng,試過把載體加到1000ng,跑出來的條帶是插入片段是亮的,載體條帶很淺,幾乎看不見,測(cè)了濃度是載體酶切后在1-2ng/ul,反復(fù)酶切過幾次都是這種結(jié)果,片段是1500bp,載體是改造載體1.6kb求大佬解答! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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其實(shí)我后面已經(jīng)重轉(zhuǎn)過了,結(jié)果也是差不多,就是感覺載體有問題,但不知道問題在哪兒,后續(xù)用酶切產(chǎn)物直接回收,沒有跑膠,得到過7-8ng/ul的濃度做了轉(zhuǎn)化,但沒有得到陽(yáng)性菌 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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