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010咦新蟲 (初入文壇)
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SDS-PAGE
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用BL21表達(dá)目的蛋白后，取未加IPTG誘導(dǎo)的菌液1ml，離心倒掉上清，將80ul的1×PBS和10ul的PMSF混勻后加入沉淀中，將沉淀重懸以后加入20ul的loading buffer沸水浴10分鐘，然后離心10分鐘，跑SDS-PAGE點(diǎn)樣時(shí)，有的樣品不會(huì)下沉到膠孔中，有的樣品卻可以，是哪個(gè)處理步驟出現(xiàn)問題呢？怎么解決?已經(jīng)排除不是膠的問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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應(yīng)該是某些菌體濃度過高，導(dǎo)致菌體粘稠不好上樣，你可以多加一些PBS按照你的方案在做，相當(dāng)于擴(kuò)大體積 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2023-05-02 19:49:58
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