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PCR的線性質粒片段連接不上 已有3人參與
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我想去除質粒上的十幾個堿基，所以在這十幾個堿基的兩端設計了引物，然后加上同一個酶切位點，計劃酶切后直接連接，讓酶切后的PCR線性質粒連接成環(huán)。用的sal1酶切位點，連接用的T4。 連接產(chǎn)物跑膠后，只看到了線性質粒條帶，沒有環(huán)狀的。菌落PCR也沒有陽性的。 各位大佬有做過的嘛，可以指點一下嗎。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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