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尛哲仙聖新蟲 (初入文壇)
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[交流]
miRNA靶基因驗證，雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?
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miRNA靶基因驗證，雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br />
實驗分組說明： miRNA（目的miRNA） miRNA-NC（陰性對照） pmir-GLO（報告質(zhì)粒空載） pmir-WT（加了含靶基因結(jié)合位點的3'UTR片段） 結(jié)果： miRNA能顯著降低pmir-WT的熒光素活性，符合預期。然而，miR-NC也能使得pmir-WT的熒光素活性下降，此處百思不得其解。 難道是加上去的序列片段能直接影響質(zhì)粒上熒光素酶活性？ 更改3'UTR長度重新構(gòu)建報告質(zhì)粒，結(jié)果還是一樣。 又進行實驗，更換轉(zhuǎn)染試劑進行對比，更換雙熒光素酶檢測盒子進行對比，結(jié)果均得到miR-NC也能使得pmir-WT的熒光素活性下降。 有沒有友友遇到同樣情況的，請教一下怎么處理才行  3'UTR片段1 3'UTR片段2 |
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