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藍(lán)帽子g新蟲(chóng) (初入文壇)
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轉(zhuǎn)錄組測(cè)序后擴(kuò)增目的片段時(shí)無(wú)法P出片段
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在公司轉(zhuǎn)錄組測(cè)序后公司返樣了RNA,之后逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后進(jìn)行擴(kuò)增,只有長(zhǎng)度在300bp以下才有條帶,500bp就p不出條帶了,我的引物是根據(jù)公司轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的結(jié)果設(shè)計(jì)的,不知道會(huì)不會(huì)因?yàn)檎?fù)鏈的關(guān)系,是否涉及正確。我現(xiàn)在想擴(kuò)增10幾條基因,每條都在1500bp左右。PCR無(wú)條帶的原因會(huì)不會(huì)因?yàn)閏DNA模板出了問(wèn)題,是否可以選擇重新采摘樣本,提取RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄 感謝! |
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