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反對派銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
請教CRISPRO 敲除基因，結(jié)果反而升高。
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最近用一個可以表達(dá)兩個gRNA的載體，構(gòu)建了一個敲除一段基因的質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染后后用抗生素篩選了20個克隆，用RT-qPCR鑒定敲除效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些克隆不但沒有敲掉，反而表達(dá)量顯著升高。計(jì)算沒有敲掉也不至于升高，請問問題出在哪里? 備注：抽提RNA后，我用DNas I去除了DNA污染. qPCR的引物也沒有問題。 |
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2樓2022-09-27 12:39:16
反對派
銀蟲 (正式寫手)
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3樓2022-10-02 04:02:56
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4樓2023-10-22 13:30:06
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