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guying03鐵桿木蟲 (小有名氣)
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從噴灑dsRNA的大麥中分離的細(xì)胞外囊泡對(duì)禾谷鐮刀菌中沒有生長抑制或基因沉默效應(yīng)
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從噴灑dsRNA的大麥中分離的細(xì)胞外囊泡對(duì)禾谷鐮刀菌中沒有生長抑制或基因沉默效應(yīng) 許多報(bào)告表明，將表達(dá)雙鏈 RNA (dsRNA) 的轉(zhuǎn)基因植物或?qū)?dsRNA 噴灑到植物葉子上，可以成功地保護(hù)植物免受利用 RNA 干擾 (RNAi) 機(jī)制的入侵病原體的侵害。dsRNA 或 siRNA 如何在供體宿主細(xì)胞和受體真菌細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移在很大程度上是未知的（圖 1）。據(jù)推測，植物細(xì)胞外囊泡 (EVs) 作為 RNA 在植物及其病原體之間穿梭。 圖片 圖 1. 該研究所用到的研究方法 最近，研究人員發(fā)現(xiàn)從宿主誘導(dǎo)的基因沉默 (HIGS) 或噴霧誘導(dǎo)的基因沉默 (SIGS) 植物中分離出的 EV 含有 dsRNA 衍生的 siRNA。在這項(xiàng)研究中，作者評(píng)估了從噴灑 dsRNA 的大麥（Hordeum vulgare）植物中分離出的 EV 是否會(huì)影響植物病原性子囊菌禾谷鐮刀菌的生長。受之前發(fā)現(xiàn)將大麥衍生的 EVs 滴在禾谷鐮刀菌培養(yǎng)物上會(huì)導(dǎo)致真菌應(yīng)激表型的鼓舞，研究人員在微量滴定板中進(jìn)行了體外生長實(shí)驗(yàn)，在該實(shí)驗(yàn)中，將禾谷鐮刀菌與從 dsRNA 噴灑的大麥葉中分離的植物 EVs 共同培養(yǎng)。結(jié)果顯示，禾谷鐮刀菌大分生孢子與大麥 EV 的共同培養(yǎng)不會(huì)影響真菌的生長（圖 2）。 圖片 圖 2. dsRNA處理后的大麥葉片純化 EV 與禾谷鐮刀菌液體培養(yǎng)物共培養(yǎng) 此外，含有 SIGS 衍生 siRNA 的植物 EV 似乎不影響禾谷鐮刀菌的生長，并且對(duì)禾谷鐮刀菌 CYP51 基因沒有基因沉默活性（圖 3）。根據(jù)這項(xiàng)研究結(jié)果，可以得出結(jié)論，要么 SIGS 衍生的 siRNA 的量不足以誘導(dǎo)禾谷鐮刀菌中的靶基因沉默，這表明 EV 在 SIGS 中的作用很小，要么是禾谷鐮刀菌從液體中攝取植物 EV 的效率低下或沒有作用。 圖片 圖 3. 共培養(yǎng)結(jié)果分析 該研究發(fā)現(xiàn)用 SIGS 和 HIGS 衍生的植物 EV 處理體外培養(yǎng)物后，禾谷鐮刀菌的生長沒有受到抑制。 同時(shí)，沒有發(fā)現(xiàn)禾谷鐮刀菌 CYP51 靶基因沉默，基于此，研究人員提出了一個(gè)問題，即禾谷鐮刀菌是否無法從液體培養(yǎng)物中吸收 EV，或者 EV 所含和粘附的 RNA 是否不足以誘導(dǎo)適當(dāng)?shù)幕虺聊磻?yīng)。 這些還需要進(jìn)一步的研究來區(qū)分不正確的 EV 攝取和 EV 可能在 HIGS 和 SIGS 中 RNA 的易位和攝取中起重要作用的可能性。 原文鏈接： https://doi.org/10.1186/s40694-022-00143-w |
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