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guying03鐵桿木蟲 (小有名氣)
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褐飛虱側(cè)輸卵管分泌蛋白可以作為RNAi的新靶點(diǎn)
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褐飛虱側(cè)輸卵管分泌蛋白可以作為RNAi的新靶點(diǎn) 輸卵管在動(dòng)物生殖過程中起著至關(guān)重要的作用,是卵子運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵管道。雖然高等動(dòng)物的輸卵管分泌已有很好的記錄,但昆蟲輸卵管分泌的蛋白質(zhì)組學(xué)信息仍知之甚少。 輸卵管是雌性生殖系統(tǒng)的“交通樞紐”,是卵子運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵管道。通過LC-MS/MS蛋白質(zhì)組檢測(cè)和轉(zhuǎn)錄組分析,鑒定了80種側(cè)輸卵管分泌蛋白。 圖片 圖 1. 雌性褐飛虱的生殖系統(tǒng) 并鑒定了5個(gè)基因(NlOdsp、NlOdsp1、NlOdsp2、NlOdsp3和NlOdsp4)在水稻害蟲褐飛虱的輸卵管中特異性表達(dá)。 圖片 圖 2. 雌性褐飛虱NlOdsp和NlOdsp1–4蛋白質(zhì)的示意圖 qRT-PCR分析表明,這些基因和蛋白質(zhì)主要在成蟲雌性生殖系統(tǒng)中特異表達(dá)。 圖片 圖 3. NlOdsp和NlOdsp1–4基因的時(shí)空表達(dá)模式分析 針對(duì)5個(gè)NlOdsp基因的RNAi實(shí)驗(yàn)表明,注射dsRNA,抑制該基因,8天后,雌性成蟲的存活率(對(duì)照的3.4%-68.7%)和生殖力(對(duì)照的3.9%-57.6%)顯著降低。 圖片 圖 4. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因?qū)诛w虱存活率的影響 圖片 圖 5. RNAi抑制NlOdsp和NlOdsp1–4基因?qū)诛w虱雌性的生殖力和孵化率影響 此外,抑制NlOdsp1導(dǎo)致側(cè)輸卵管內(nèi)凝膠狀棕色分泌物減少,而dsNlOdsp2組的分泌物增加。 圖片 圖 6. RNAi抑制NlOdsp1–4基因6天后雌性的輸卵管表型 此外,NlOdsp3是一個(gè)多效性基因,參與卵母細(xì)胞發(fā)育和卵子通過側(cè)輸卵管的運(yùn)動(dòng),類似于NlOdsp在卵子運(yùn)輸中的作用。 圖片 圖 7. dsNlOdsp3注射后對(duì)雌性褐飛虱的影響 圖片 圖 8. RNAi處理抑制基因后側(cè)輸卵管組織學(xué)橫截面的全景圖像 該結(jié)果加深了我們對(duì)雌性昆蟲輸卵管分泌蛋白的理解,并為基于RNAi的害蟲防治提供了新的靶基因。 原文鏈接: https://doi.org/10.1016/j.jprot.2022.104670 |
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