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[求助]
求助，sgRNA引物設(shè)計時，為什么BsaI的酶切位點為GGCA和AAAC? 已有2人參與
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求助，bsai的酶切位點為 5’.....ggtctc（n）1.....3‘ 3’.....ccagag（n）5......5‘ 為什么在設(shè)計sgrna時，正向引物的5’端加入的堿基是ggca，反向引物的5’端加入的是aaac? |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
一粒種子: 金幣+10, 原來是與載體的結(jié)構(gòu)序列有關(guān)，非常感謝您！ 2022-07-19 15:39:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
一粒種子: 金幣+10, 原來是與載體的結(jié)構(gòu)序列有關(guān)，非常感謝您！ 2022-07-19 15:39:15
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BsaI酶的識別位點，和剪切位點是不同的。 5’.....ggtctc（n）1.....3‘ 3’.....ccagag（n）5......5‘ ggtctc是識別位點，然后+1后才會切，后面的序列可以隨便是什么。而當(dāng)時這個載體的發(fā)明人，就恰好設(shè)計成ggca。 另一端為什么是AAAC呢？一位還有第二個BsaI酶的位點，載體的發(fā)明人第二個切的地方設(shè)計成AAAC。 你仔細(xì)把序列看一下，就會明白 |
2樓2022-07-16 13:46:52
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金蟲 (小有名氣)
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3樓2022-07-16 18:55:34
4樓2022-07-19 15:40:01
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