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菜雞咕嚕新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
研二菜雞求助，感覺(jué)畢不了業(yè)了，求助 已有8人參與
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我做的是小分子蛋白的表達(dá)，我質(zhì)粒確認(rèn)是轉(zhuǎn)進(jìn)去了的，我把誘導(dǎo)后的菌體拿去做了pcr，有正確的目的條帶。但是破碎菌體后的蛋白沒(méi)有抑菌活性，（該蛋白是一種抑菌的小分子肽）200bp左右，我的條件是 卡那霉素0.4mg/mL，IPTG是0.4mM，16℃200 rpm 16h，加誘導(dǎo)劑時(shí)的菌液OD600是0.6。我想問(wèn)下這種問(wèn)題出在哪里呀，感覺(jué)自己都畢不了業(yè)了。希望大家能給點(diǎn)建議吧，感謝各位！ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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嚯嚯哈嘿19
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8樓2022-07-01 11:00:03
花輪君
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蛋白沒(méi)有活性也許是表達(dá)出的蛋白沒(méi)有正確的功能折疊或者一些修飾？ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
2樓2022-06-27 08:34:35
菜雞咕嚕
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3樓2022-06-27 10:25:14
花輪君
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不知道你這個(gè)蛋白是完全全新的還是說(shuō)有類似報(bào)道但你們發(fā)現(xiàn)了未報(bào)道的活性，如果有已經(jīng)報(bào)道的可以試下別人做過(guò)的載體，如果是全新的可以嘗試多做幾種表達(dá)載體。我不是這個(gè)領(lǐng)域的，多和導(dǎo)師討論一下可能好一些，有時(shí)候自己弄很容易陷入誤區(qū)。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
4樓2022-06-27 21:20:01
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