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菜雞咕嚕新蟲 (初入文壇)
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[交流]
研二菜雞求助,感覺畢不了業(yè)了,求助 已有8人參與
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我做的是小分子蛋白的表達(dá),我質(zhì)粒確認(rèn)是轉(zhuǎn)進(jìn)去了的,我把誘導(dǎo)后的菌體拿去做了pcr,有正確的目的條帶。但是破碎菌體后的蛋白沒有抑菌活性,(該蛋白是一種抑菌的小分子肽)200bp左右,我的條件是 卡那霉素0.4mg/mL,IPTG是0.4mM,16℃200 rpm 16h,加誘導(dǎo)劑時(shí)的菌液OD600是0.6。我想問下這種問題出在哪里呀,感覺自己都畢不了業(yè)了。希望大家能給點(diǎn)建議吧,感謝各位! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (著名寫手)
新蟲 (初入文壇)
木蟲 (著名寫手)
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不知道你這個(gè)蛋白是完全全新的還是說有類似報(bào)道但你們發(fā)現(xiàn)了未報(bào)道的活性,如果有已經(jīng)報(bào)道的可以試下別人做過的載體,如果是全新的可以嘗試多做幾種表達(dá)載體。我不是這個(gè)領(lǐng)域的,多和導(dǎo)師討論一下可能好一些,有時(shí)候自己弄很容易陷入誤區(qū)。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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