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MAIT新蟲 (小有名氣)
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[求助]
接合轉(zhuǎn)移
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我將創(chuàng)傷弧菌和含有pDM4的S17-1λpir 37℃ 220rpm搖過夜,然后按照4:1的供受體菌的比例混合,100微升重懸,30微升每滴滴在TSA平板上,30℃ 14小時。然后用BHI沖下菌取100微升涂布在雙抗LB平板上,30℃48h,但是一直長不出菌,想請教各位后續(xù)實驗我需要從哪些地方入手進行更改。另外我有幾個問題想請教,1、是否需要在平板中加入DAP。2、是否必須將混合菌液滴在濾膜上。3、搖床轉(zhuǎn)速過高是否會影響接合轉(zhuǎn)移的效率。4、接合轉(zhuǎn)移供受體菌的比例該怎么定。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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