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學(xué)術(shù)衣冠木蟲 (正式寫手)
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難道Bioanalyzer能夠一次定量所有樣品中小分子核酸的大小嗎 已有1人參與
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最近在看一個(gè)外文文獻(xiàn)，主題是提供一種通過裂解植物材料、調(diào)節(jié)PH從而提取小分子RNA的方法，為了證明提取的核酸里只有RNA不含DNA，驗(yàn)證方法是采用Bioanalyzer分別對添加DNA酶前后的提取液進(jìn)行RNA定量， DNA酶處理前后定量曲線沒有變化則證明沒有DNA。譯文如下： 為了顯現(xiàn)DNA酶作用之后對照溶液和根據(jù)實(shí)施例3的提取物的概況，在用DNA酶處理之前和之后用 定量小RNA。用或不用DNA酶處理植物提取物的情況下獲得的概況是相同的，量保持相同或近似30mg/kg，如圖3 中所示。向每個(gè)分析都添加內(nèi)部標(biāo)記物(圖3 中在4nt的峰)，并充當(dāng)用于驗(yàn)證分析的正確運(yùn)行的內(nèi)部對照。 用DNA酶(特異性降解DNA而不是RNA的酶)測試表明根據(jù)實(shí)施例3的提取物的核酸在用DNA酶處理之后仍然存在。因此其實(shí)際上是RNA，特別是具有150個(gè)核苷酸的最大長度的低分子量RNA，而不是DNA。 沒有接觸過Bioanalyzer，但查詢到Bioanalyzer分析RNA和DNA是不同的芯片，采用的是不同的試劑盒。我的理解是：由于定量小RNA時(shí)無法檢測DNA，那么無論處理前后的提取液DNA是否降解， 定量小RNA的結(jié)果都應(yīng)該沒有變化。也就是說文獻(xiàn)的這種Bioanalyzer定量RNA的方式無法證明提取液中是否含有DNA。 疑問： 難道Bioanalyzer能夠一次定量所有樣品中小分子核酸的大小嗎。還是RNA和DNA必須采用不同芯片分別測量。 @biostar2009 @wizardfan 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2022-04-15 15:48:11
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