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星星中的亮新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
pMG36e質(zhì)粒轉(zhuǎn)化和提取
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求助！ 之前用DH5a轉(zhuǎn)化pMG36e，能在紅霉素下長(zhǎng)出來(lái)，空白的沒(méi)長(zhǎng)，后提質(zhì)粒，能測(cè)出濃度但是跑不出條帶，濃度有100微克每毫升，請(qǐng)問(wèn)是怎么回事？ 在論壇上看到有博主說(shuō)用MC1061感受態(tài)細(xì)胞可以解決這個(gè)問(wèn)題，想問(wèn)一下大家用這個(gè)感受態(tài)細(xì)胞有沒(méi)有啥注意事項(xiàng)，復(fù)蘇的話建議用LB可以嗎，還是SOC啊？因?yàn)橹挥幸粊G丟質(zhì)粒了，不敢亂搞啊 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
| pMG36e乳酸菌胞內(nèi)質(zhì)粒克隆菌株是MC1061，紅霉素這個(gè)抗性一般用的比較少，做感受態(tài)的公司不會(huì)質(zhì)檢這個(gè)抗性，建議買個(gè)MC1061，質(zhì)檢下紅霉素陰性，沒(méi)問(wèn)題換這個(gè)感受態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)化提取。pMG36e乳酸菌胞內(nèi)質(zhì)粒這個(gè)質(zhì)粒比較好提，濃度會(huì)很高，你用DH5a測(cè)數(shù)值有，但是電泳沒(méi)有，肯定是沒(méi)有提出來(lái)，測(cè)的是鹽離子數(shù)值或者基因組等數(shù)值了 |
2樓2022-03-23 22:55:39
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