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Earlyli新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
基因克隆測(cè)序結(jié)果不是目標(biāo)基因 已有1人參與
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| 最近在擴(kuò)增植原體的多個(gè)基因,PCR能得到目標(biāo)條帶,但是測(cè)序結(jié)果總是比對(duì)到別的菌,大部分都是枯草芽孢桿菌,單菌落檢測(cè)也是目標(biāo)條帶,酶用的taq酶,試著換過(guò)模板了,還是不行,目前用的模板都是經(jīng)過(guò)16S rRNA基因檢測(cè)是植原體的,但是其他基因就是克隆不出來(lái),大半年了,快奔潰了,希望有人能給我指點(diǎn)指點(diǎn),謝謝各位了 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
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克隆常用pfu和kod。一般認(rèn)為taq錯(cuò)配率高于前面兩個(gè),實(shí)驗(yàn)室常用來(lái)做菌落菌液鑒定,一般不用來(lái)克隆基因。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (小有名氣)
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個(gè)人感覺(jué)哈,枯草芽孢桿菌的相關(guān)序列應(yīng)該比你的序列在數(shù)據(jù)庫(kù)中多很多的。。。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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