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HL60做敲除,用了Lipo3000和電轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)染效率都極低,怎么辦?
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| 我現(xiàn)在需要敲除HL60細(xì)胞上的一個(gè)膜蛋白。先用GFP的質(zhì)粒做預(yù)實(shí)驗(yàn),看下轉(zhuǎn)染效率。先用lipo3000試了2次,基本一個(gè)孔的細(xì)胞就1-2個(gè)轉(zhuǎn)進(jìn)去的。后面試了電轉(zhuǎn),按說明書上專門針對(duì)HL60的實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置的,但轉(zhuǎn)染效率最高也就5%。但說明書上說,HL60的電轉(zhuǎn)效率有55%。 |
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