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求助于各位老師！過表達(dá)蛋白條帶異常，過表達(dá)條帶不與內(nèi)源重合
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各位老師，同門好，我面臨的主要問題是，用PCDH（載體圖譜如下圖1），帶有3Flag標(biāo)簽，及T2A元件 構(gòu)建目的蛋白過表達(dá)載體，病毒包裝后，經(jīng)過三天puro藥篩，對藥篩后得到的細(xì)胞進(jìn)行WB檢測，WB結(jié)果如下圖2，293穩(wěn)賺細(xì)胞株結(jié)果顯示，過表達(dá)條帶位于內(nèi)源條帶上方，分子量大小明顯大于內(nèi)源條帶，而預(yù)測蛋白分子量為70.8kDa, 表達(dá)蛋白預(yù)測分子量為75.91kDa, 用10%的分離膠會有如此明顯差異嗎，12%的膠我也跑過，也是明顯的兩條帶。 懇請各位老師，同門指點(diǎn)！ 圖1.jpg 圖2.jpg |
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4樓2021-10-12 20:43:20
2樓2021-10-12 16:58:23
3樓2021-10-12 20:19:51
我不再玩灬
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2021-10-22 17:03:57
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