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北京艾柏森鐵蟲 (小有名氣)
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細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一)
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什么是細胞培養(yǎng)? 細胞培養(yǎng)是指將細胞從動物或植物體內(nèi)取出,然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離,也可以來源于已建立的細胞系或細胞株。 原代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)是指細胞從組織中分離出來后,在適宜條件下增殖,直到它們占據(jù)所有可用的基質(zhì)(即達到匯合狀態(tài))的培養(yǎng)階段。在此階段,必須通過將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進行繼代培養(yǎng)(即傳代),以為其提供更多的繼續(xù)生長空間。 細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一) 原代成肌細胞 細胞系 第一次傳代培養(yǎng)后,原代培養(yǎng)物即被稱為細胞系。來自于原代培養(yǎng)的細胞系壽命有限(即:有限細胞系),隨著細胞的傳代,生長能力最強的細胞會占據(jù)優(yōu)勢,最終導致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性。 細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一) 人腎癌細胞 細胞株 如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細胞系的亞群,則該細胞系成為一個細胞株。與親代細胞系起始時相比,細胞株通常會獲得一些其他的遺傳學改變。 細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一) 人乳腺管癌細胞株 有限細胞系與連續(xù)細胞系 正常細胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會喪失增殖能力,這是一種由遺傳決定的事件,稱之為衰老;此類細胞系被稱為有限細胞系。但是,一些細胞系可以通過被稱為轉(zhuǎn)化的過程而變?yōu)橛郎毎,該過程可以自發(fā)發(fā)生,也可以通過化學或病毒誘導而發(fā)生。當一個有限的細胞系經(jīng)歷轉(zhuǎn)化并獲得無限分裂的能力時,它就成為了一個連續(xù)細胞系。 培養(yǎng)條件 各種細胞的培養(yǎng)條件相差很大,但是培養(yǎng)細胞的人工環(huán)境必須包括合適的容器,其中含有一定的基質(zhì)或培養(yǎng)基,為細胞提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)(氨基酸、碳水化合物、維 生素、礦物質(zhì))、生長因子、激素和氣體(O2、CO2 ),并調(diào)節(jié)生理化學環(huán)境(pH、滲透壓、溫度)。大多數(shù)細胞為貼壁依賴性細胞,必須附著于固體或半固體基質(zhì)上培養(yǎng)(貼壁培養(yǎng)或 單層培養(yǎng)),而另一些細胞則可在培養(yǎng)基中漂浮生長(懸浮培養(yǎng))。 冷凍保存 如果傳代時有多余的細胞,則可使用適當?shù)谋Wo劑(例如DMSO或甘油)處理細胞, 并在-130°C以下的溫度下保存(冷凍保存),直至使用。 細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一) 培養(yǎng)細胞的形態(tài) 根據(jù)細胞的形狀和外觀(即形態(tài)),可將其分為三大類。 細胞培養(yǎng)知識庫:細胞培養(yǎng)簡介(一) 細胞培養(yǎng)的應用 細胞培養(yǎng)是細胞和分子生物學所使用的一項重要技術,為細胞正常生理和生化研究 (如代謝研究、衰老研究)、藥物和毒性化合物對細胞的作用、以及致突變性和致癌 性研究提供了上佳的模型系統(tǒng)。 細胞培養(yǎng)還可用于藥物篩選和開發(fā),以及生物化合 物(如疫苗、治療性蛋白質(zhì))的大規(guī)模生產(chǎn)。在這些應用中,使用細胞培養(yǎng)的一大優(yōu) 勢在于,使用來源于同一克隆的一批細胞可獲得穩(wěn)定一致、可重復的結果。 未完待續(xù) |
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