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kkk空kkk新蟲 (初入文壇)
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[求助]
western blot問題
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蝦中提取的蛋白（36kDa）做了模擬胃消化實(shí)驗(yàn)，電泳圖看上去還可以，但是western blot結(jié)果簡(jiǎn)直離譜。轉(zhuǎn)膜條件（200mA，1.5h）使用的PVDF膜(0.45μm)，5%奶粉室溫封閉1h，一抗1:5000室溫孵育2h（一抗兔多抗，之前4℃過(guò)夜也不太好），二抗1:5000室溫孵育1h。 考慮接下來(lái)?yè)Q成NC膜，使用5%BSA封閉是否可行？濾紙一定要用雜交濾紙嗎？還有其他需要注意的地方嗎？ 希望各位大佬指點(diǎn)一下，真的有點(diǎn)難。 電泳.jpg western blot.jpg |
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ZSder
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2樓2021-09-25 09:30:29
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