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構(gòu)建質(zhì)粒,目的基因前加信號肽導(dǎo)致目的基因缺失或大腸桿菌致死 已有1人參與
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發(fā)現(xiàn)了有趣的現(xiàn)象 在構(gòu)建質(zhì)粒過程中,在目的基因前加信號肽導(dǎo)致會目的基因序列缺失或大腸桿菌致死,大家有沒有遇到這樣的情況?或者大概分析一下可能是哪些原因呢? |
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ccdB蛋白的毒性作用是通過與促旋酶GyrA亞基第462位氨基酸相結(jié)合使得DNA斷裂后不能進(jìn)行修復(fù),DNA合成受阻,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。 DB3.1菌株的細(xì)胞含有g(shù)yrA462基因,能夠表達(dá)GyrA亞基蛋白與ccdB結(jié)合的區(qū)域,可以競爭性抑制ccdB蛋白的活性,使得促旋酶可以正常行使功能,實(shí)現(xiàn)含有ccdB的載體的正常擴(kuò)增。 -------------------------以上轉(zhuǎn)自豆丁 根據(jù)以上信息, 是不是可以理解為信號肽可能是ccdB蛋白在空間上逃逸GyrA的結(jié)合, 從而致死(這只是推測, 可能性之一吧) |

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