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LS-Cui新蟲 (初入文壇)
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[交流]
做快速核酸檢測(cè)需要知道的那些技術(shù)（六）
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今天我們來分享關(guān)于用重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)成品試劑盒做實(shí)驗(yàn)中需要注意的事項(xiàng)等。 1.用重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)成品試劑盒跑膠過程中，沒有條帶，但是膠孔里面很亮，一般是什么原因？ 可能是沒有純化造成的，需要按照純化方法進(jìn)行純化。 2.跑電泳的反應(yīng)時(shí)間大概需要多久？ 濃度低的話，40分鐘，濃度高的話可以時(shí)間短點(diǎn)，20~30分鐘都可以。 3.跑電泳和熒光法有什么區(qū)別？ 跑電泳款基本就是恒溫?cái)U(kuò)增的基本版本。 熒光的是額外加了個(gè)酶可以切割探針。 4.DNA變RNA是轉(zhuǎn)錄，那RNA變DNA是什么？ RNA變DNA是逆轉(zhuǎn)錄。 5.我可以在前引物標(biāo)記熒光素，后引物標(biāo)記生物素，而不設(shè)計(jì)探針可以嗎？ 可以這樣用，但假陽性概率大，需要大量篩選引物。 6.核酸內(nèi)切酶針對(duì)哪個(gè)探針的？eco? nfo? fpg? 還是其他？ 應(yīng)該是針對(duì)nfo。 |
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