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LS-Cui新蟲 (初入文壇)
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[交流]
做快速核酸檢測需要知道的那些技術(shù)（二）
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今天接著來聊一聊重組酶和聚合酶等溫檢測，上次聊了重組酶和聚合酶等溫檢測的原理、特點(diǎn)、應(yīng)用等，下面談?wù)勏嚓P(guān)的引物、探針等其他信息。 1、PCR 引物可以用于重組酶和聚合酶等溫檢測嗎？ 可以。具有PCR常用長度(例如18-23 bp)的引物可很好地用于重組酶和聚合酶等溫檢測。不過反應(yīng)可能會稍慢，如果想要快速擴(kuò)增，建議使用稍微長一些的引物（長度最好大于30 bp）。 2、PCR探針可以用于重組酶和聚合酶等溫檢測嗎？ 不可以，大部分利用聚合酶的 5’-3’核酸酶活性的探針不能用于重組酶和聚合酶等溫檢測。 3、重組酶和聚合酶等溫檢測擴(kuò)增片段大小？ 重組酶和聚合酶等溫檢測體系主要是針對快速擴(kuò)增而設(shè)計的，一般擴(kuò)增片段不超過500 bp。 4、重組酶和聚合酶等溫檢測需要幾條引物？幾條探針？ 重組酶和聚合酶等溫檢測同PCR一樣，需要兩條引物，如果引入探針，需要一條探針，探針位置同PCR一樣，位于兩條引物之間。 5、重組酶和聚合酶等溫檢測在反應(yīng)時，需要特殊的儀器嗎？ 不需要。對基礎(chǔ)試劑盒而言，只要溫度能控制在37°C即可。進(jìn)行實時監(jiān)控的體系，需要能夠激發(fā)和檢測熒光團(tuán)的恒溫裝置。 |
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