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525610427新蟲 (初入文壇)
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[求助]
pEASY-Blunt平末端連接，板子上比我臉還干凈 已有1人參與
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我使用的是TransGene的pEASY-Blunt載體，感受態(tài)用的是生工的 目的基因PCR產(chǎn)物為20ul，我取了5ul電泳檢測，條帶正確 然后取PCR產(chǎn)物3ul和vector1ul混合（我懷疑就是目標(biāo)片段濃度太大，導(dǎo)致我的失敗），25℃15min， 后續(xù)的轉(zhuǎn)化完全按說明書轉(zhuǎn)化，沒有任何改變，但是涂板以后，板子比我臉還干凈。 我想試著降低目標(biāo)片段的濃度，但是網(wǎng)上有人說由于高鹽體系，核酸定量儀的取值不可取。 求求各位了 |
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之前載體和片段同源重組的時候，也遇到過片段太多而未有陽性克隆的現(xiàn)象，建議減少片段濃度，但又不能太低，嘗試多幾種比例試試，每個都涂板看看 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-04-27 23:57:38
tjj451679479
新蟲 (小有名氣)
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3樓2021-04-28 11:39:40
fengxueren
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4樓2022-01-04 00:25:11
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