 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1101 | 回復(fù): 3 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者桃夭夭啊將贈送您 5 個(gè)金幣 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
桃夭夭啊新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
反轉(zhuǎn)錄失敗，求助 已有1人參與
|
|
| 跑膠驗(yàn)證了提取的RNA沒有問題，用試劑盒反轉(zhuǎn)錄，一批里面總有失敗的，就很絕望。也不清楚到底是哪里出了問題 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有289人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
桃夭夭啊
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 123
- 散金: 10
- 帖子: 44
- 在線: 1.7小時(shí)
- 蟲號: 22041022
- 注冊: 2020-05-02
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2021-04-07 09:45:50
915191677
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 594.1
- 散金: 14
- 帖子: 73
- 在線: 72.7小時(shí)
- 蟲號: 2319267
- 注冊: 2013-03-05
- 專業(yè): 臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)
2樓2021-03-17 11:18:27
atikou
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.9
- 帖子: 96
- 在線: 18.9小時(shí)
- 蟲號: 22783210
- 注冊: 2020-06-10
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
|
你可以試一下這個(gè)方法 First-Strand cDNA Synthesis Using SuperScript™ II RT A 20-μL reaction volume can be used for 1 ng–5 μg of total RNA or 1–500 ng of mRNA. 1. Add the following components to a nuclease-free microcentrifuge tube: Oligo(dT)12-18 (500 μg/mL) or 1 μL 50–250 ng random primers or 2 pmole gene-specific primer (GSP) 1 ng to 5 μg total RNA or x μL 1–500 ng of mRNA 1 μL dNTP Mix (10 mM each) 1 μL Sterile, distilled water to 12 μL 2. Heat mixture to 65°C for 5 min and quick chill on ice. Collect the contents of the tube by brief centrifugation and add: 5X First-Strand Buffer 4 μL 0.1 M DTT 2 μL RNaseOUT™ (40 units/μL) (optional)* 1 μL *RNaseOUT™ (Cat. No. 10777-019) is required if using <50 ng starting RNA. 3. Mix contents of the tube gently. If you are using oligo(dT)12-18 or GSP, incubate at 42°C for 2 min. If you are using random primers, incubate at 25°C for 2 min. 4. Add 1 μL (200 units) of SuperScript™ II RT and mix by pipetting gently up and down. If you are using less than 1 ng of RNA, reduce the amount of SuperScript™ II RT to 0.25 μL (50 units) and add sterile, distilled water to a 20 μL final volume. If you are using random primers, incubate tube at 25°C for 10 min. 5. Incubate at 42°C for 50 min. 6. Inactivate the reaction by heating at 70°C for 15 min. --------來著易基因的回答 |
4樓2021-08-26 17:08:17
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
