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DNA雜交的緩沖液和溫度的條件~ 已有1人參與
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| 請(qǐng)問(wèn)各位DNA分子雜交的條件和溫度是什么呢? 之前我是在PH7.4的PBS中雜交的,但雜交效率貌似不高,看了幾篇文獻(xiàn) 每篇文獻(xiàn)的雜交緩沖液都不是完全相同,所以想問(wèn)一下雜交緩沖液中必須存在哪些離子,溫度方面有看到加熱到95℃變性5min,然后冰上驟冷,然后室溫下反應(yīng)2h的,也有高溫變性后,梯度降溫反應(yīng)的,不知道這兩種溫度差別那個(gè)效率更高,有原理支撐的解釋最好~~~~~ 最后一個(gè)問(wèn)題FAM標(biāo)記的DNA序列,在95℃下加熱的話對(duì)FAM有影響嗎? |
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