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sss小鱷魚新蟲 (初入文壇)
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雙酶切緩沖液溫度都不一樣
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我現(xiàn)在需要切一個載體連上片段，用的酶是MluI和BstBI，這兩個沒緩沖液和溫度都不一樣，有沒有用過這兩個酶酶切的朋友，切的時候是怎么操作，先切哪個呢？我想的操作是先100ul體系載體添加不超過3000ng，切MluI溫度是37°，切4小時，緩沖液是buffer3.1，切兩管，切完以后直接上柱子膠回收，兩管合成一管，100ul體系再切BstBI，溫度是65°，在pcr儀里切3.5小時，buffer是cutsmart，有沒有懂得人看一下我的操作有沒有問題，之前切的載體一直不行，跟片段一直連不上，感謝大家 @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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