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真核轉(zhuǎn)錄組測序
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| 想要做真菌的有參轉(zhuǎn)錄組測序,已經(jīng)做了該菌基因組的de nove的二三代聯(lián)用測序。但是有點不太明白,轉(zhuǎn)錄組測序平臺使用的是二代測序平臺,那基因組做三代測序有什么意義嗎? |
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我覺得你的描述中涉及到兩個不太相關的問題,不應該兩個問題混在一起討論。1)二代+三代基因組測序是一個問題,二三代一起測,可以更好的assemble一個參考基因組。因為二代測序很準,但由于太短(最長一般也就2*250bp左右),很難解決基因組中的重復區(qū)域的assemble。三代測序雖然錯誤率比較高,但測序比較長,在assemble過程中可以起到指向標的作用,幫助解決重復區(qū)域拼接的問題。2)轉(zhuǎn)錄組測序可以用二代或三代,但轉(zhuǎn)錄本一般沒有那么長(三代可以到1Mb以上),且三代的錯誤率比較高。因此目前一般用二代測序轉(zhuǎn)錄組。后續(xù)分析可以用常規(guī)流程:表達量定量、差異表達基因?qū)ふ摇⒐δ芨患、網(wǎng)絡構建等。 |
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