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yuzhongbaihe新蟲 (正式寫手)
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[交流]
如何把兩個(gè)基因克隆在一個(gè)載體上
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有做過雙基因共載體的大神們嗎？想請(qǐng)教一下具體細(xì)節(jié)如何把兩個(gè)基因整合到一個(gè)載體上 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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pennchem
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2樓2020-07-11 20:53:45
haoziying
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提前分析兩個(gè)目的基因的酶切位點(diǎn)，選擇mcs的靠前位置的位點(diǎn)連接，也可以在設(shè)計(jì)兩段目的基因的引物時(shí)加入酶切位點(diǎn)（該酶不切目的基因），通過兩次克隆連接。串聯(lián)表達(dá)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2020-07-12 05:50:01
forhighbio 
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7樓2020-07-12 12:22:02
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9樓2020-07-12 13:05:41
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（1）想把兩個(gè)蛋白同時(shí)表達(dá)在一起（表達(dá)成一個(gè)融合蛋白），這個(gè)可以加linker可以實(shí)現(xiàn) （2）如果兩個(gè)蛋白表達(dá)出來，在第一個(gè)蛋白TAA結(jié)尾，第二個(gè)蛋白ATG開頭，原來是TAA ATG， 可以縮為 TAA TG，這樣ribosome在中止第一個(gè)閱讀框后，馬上遇到起始子ATG，繼續(xù)進(jìn)行翻譯。 |
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yuzhongbaihe10樓2020-07-13 08:14:27
3樓2020-07-11 20:58:33
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4樓2020-07-11 21:04:50
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我們是想把2個(gè)殺蟲蛋白構(gòu)建到自己改造的一個(gè)載體上，所以第2種方法肯定不能用了，第一種方法我還是不太理解呢，我這兩個(gè)基因都是3000多bp的，肯定不能全部都克隆上去？能給再說的具體些嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2020-07-11 22:19:09
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8樓2020-07-12 12:51:24
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