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caichenggu鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
無痕敲除抗生素失效
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| 最近在用自殺質(zhì)粒pk18mobsacb敲除紅球菌的基因,在敲除一個目的基因后,再敲下一個基因的時候電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后用卡娜霉素篩選的時候平板長出了大量菌落,挑取了一些菌落均為沒有進(jìn)行一輪同源交換的菌,而對照組沒有轉(zhuǎn)質(zhì)粒的平板卻沒有菌生長,苦思冥想不知道什么原因,有哪位前輩曾經(jīng)遇到過這種問題嗎,請指教一下 |
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鐵蟲 (小有名氣)
捐助貴賓 (著名寫手)
新蟲 (小有名氣)
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這個質(zhì)粒是經(jīng)過兩輪同源重組敲基因的啊,在卡那上能長,應(yīng)該是經(jīng)過一輪重組,你還得用15%蔗糖篩兩輪重組后的陽性克隆啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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