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wjykycg至尊木蟲 (正式寫手)
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[交流]
PCR產(chǎn)物擴(kuò)增不出來,只有引物二聚體的位置有條帶 已有9人參與
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模板是反轉(zhuǎn)錄的cDNA,懷疑過模板的問題,換了幾批不同細(xì)胞的cDNA還是不行。也懷疑過引物,重新合成過,也調(diào)整過序列重新合成,都不行。 關(guān)鍵是之前擴(kuò)增出來過,但是后來就怎么也擴(kuò)增不出來。難道是聚合酶或者Buffer出問題了? |
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你設(shè)計(jì)一個(gè)內(nèi)參基因作為陽性對(duì)照,確保你模板沒問題,然后就是你的基因大小問題,如果基因太大,那就分段PCR克隆,1000bp以內(nèi)都還好,酶的問題,可能性比較低,還有就是你試試把PCR產(chǎn)物作為模板進(jìn)行二次PCR,你試試吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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