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soarshining捐助貴賓 (著名寫手)
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[求助]
請(qǐng)問如何保持2-△△Ct比出來的比值在重復(fù)實(shí)驗(yàn)中穩(wěn)定？
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最近qpcr遇到了難題，老板要求qpcr結(jié)果不僅顯著性要能重復(fù)，而且誘導(dǎo)目的基因mrna增加的倍數(shù)也要穩(wěn)定。想問大家，這個(gè)表達(dá)增加的倍數(shù)在同種刺激下是穩(wěn)定的嗎？ 比如我加了抑制劑處理24 h，第一次qPCR發(fā)現(xiàn)目的基因相對(duì)Ctrl組（DMSO組）增加了10倍，第二次重復(fù)卻增加了60倍，雖然都有顯著性但是這個(gè)倍數(shù)是不一樣的。以前qPCR從來沒有關(guān)注過倍數(shù)，都是算完p值就下結(jié)論了。想請(qǐng)教這個(gè)可以穩(wěn)定嗎？ |
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