 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » sgRNA構建建議教程
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1524 | 回復: 2 | |||
[交流]
sgRNA構建建議教程 已有1人參與
|
|
sgRNA構建建議教程 1， 引物設計，https://crispr.cos.uni-heidelberg.de/； 2， 引物退火，引物稀釋到20nM，正反向引物分別取10ul混合，取0.5-1L水加熱到沸騰，混合后引物放入，自然冷卻到室溫（2-4小時）； 3， 酶切連接，取200ng質(zhì)粒（不用太多，減少自連），取5ul退火的引物，T4連接酶和內(nèi)切酶10×bufffer分別取0.5ul，ddH2O補到10ul 4， PCR儀器設置程序（時間緊張可以減少循環(huán)數(shù)或者減少循環(huán)內(nèi)時間） 1)，37℃ 5min 2)，37℃ 5min 3)，16℃ 10min 第2,3步15-20個循環(huán) 4)，16℃ 10min 5， 產(chǎn)物用于轉化； 6， PCR檢測，用sgRNA引物，配合載體上引物PCR檢測； 7， 送測序 |
回復此樓» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負責。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識產(chǎn)權問題，其責任在于用戶本人，如對版權有異議，請聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : sgRNA構建建議教程.docx
2019-12-05 09:35:48, 84.52 K
» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測的實際應用案例
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有161人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
f1789954073y
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1056.1
- 帖子: 282
- 在線: 31.7小時
- 蟲號: 4050579
- 注冊: 2015-09-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
2樓2020-05-14 22:51:16
f1789954073y
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1056.1
- 帖子: 282
- 在線: 31.7小時
- 蟲號: 4050579
- 注冊: 2015-09-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
3樓2020-05-14 22:51:40
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 質(zhì)粒寶 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 環(huán)境工程學碩288求助調(diào)劑 +7 | 多吃億口芝士 2026-03-02 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
085600 英一數(shù)二272求調(diào)劑
 5+6
|
vida_a 2026-03-01 | 44/2200 |
|
|
|
[考研] 理學，工學，農(nóng)學調(diào)劑，少走彎路，這里歡迎您！ +8 | likeihood 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +9 | ErMiao1020 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料328求調(diào)劑 +4 | 一個蘿卜02 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學，化學專業(yè)344分，求調(diào)劑 +6 | 邢xing1 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 計算機學碩 分數(shù)285求調(diào)劑
+4
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +6 | 好運連綿不絕 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中國科學技術大學材料與化工281求調(diào)劑，有科研和獲獎經(jīng)歷 +6 | wsxw 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 338求調(diào)劑 +5 | 18162027187 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料化工調(diào)劑 +13 | 今夏不夏 2026-03-01 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學生 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 306分材料調(diào)劑 +5 | chuanzhu川燭 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +3 | 恒順自然 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工328求調(diào)劑 +3 | 。，。，。，。i 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請]
本子寫完了，給DS兄弟看了，得了92分
+3
|
Doma 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工299分求調(diào)劑 一志愿985落榜 +5 | 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿]
求助coordination chemistry reviews 的寫作模板
10+3
|
ljplijiapeng 2026-02-27 | 4/200 |
|