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桂鬼鬼材料木蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)形成多聚體,如何能打開形成單體
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最近在做一個蛋白,做SDS膠能看到樣品很純,但是跑Native或者分子篩發(fā)現(xiàn)存在很多多聚體。因為這個蛋白表面有很多帶電荷氨基酸,猜測是由于靜電作用。 現(xiàn)在別人要求蛋白必須是native膠一條帶或者分子篩一個峰。 已經(jīng)嘗試過加SDS,精氨酸,谷氨酸,肌氨酸。 準(zhǔn)備嘗試tween-20。但是目前為止效果不太好,除了高濃度SDS。 想問一下大家有沒有類似經(jīng)驗,怎樣打開聚集體,加哪些東西可以?濃度大概多少? 而且還有一個問題是跑分子篩,這些添加劑會被稀釋去除。如果去除這些添加劑后,如何避免再形成多聚? 多謝!! |
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