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分子小白呀新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
PCR無(wú)條帶 已有4人參與
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我連接轉(zhuǎn)化后的菌液，放4度冰箱差不多有兩個(gè)月了，今天重新涂了平板，藍(lán)白斑篩選后，按正常程序跑了PCR，電泳，PCR Mix用的新買(mǎi)的康為2xEs Tap MasterMix，跑了100多個(gè)菌液的樣，但是沒(méi)有一條條帶，請(qǐng)問(wèn)是哪里出了問(wèn)題呢？菌液放太久不能用了嗎？分子新手，求助高人指導(dǎo) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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pl19940314
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2樓2019-09-19 00:22:36
z457634588
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你猜兩個(gè)月質(zhì)粒在抗生素逐漸消耗完的情況下會(huì)不會(huì)丟失？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2019-09-19 15:35:09
格洛米吃草
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4樓2023-08-24 11:38:01
if mine
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| 真要分析的話(huà)，可能性還挺多的。如果質(zhì)粒沒(méi)有丟失，藍(lán)白斑實(shí)驗(yàn)也可能出現(xiàn)假陽(yáng)。質(zhì)粒丟失的話(huà)，抗性失效，如果你倒平板的LB溫度過(guò)高，抗生素失效了，菌落也能長(zhǎng)起來(lái)，你再去p，肯定啥也沒(méi)有。個(gè)人覺(jué)得還是放的時(shí)間太長(zhǎng)了，質(zhì)粒丟失。反正自己慢慢排除故障因素吧，如果都沒(méi)問(wèn)題，換個(gè)酶試試？康為的我沒(méi)用過(guò)，最近試用了個(gè)公司的酶，效果挺好的。哪家我就不說(shuō)了，省得說(shuō)我是托，想討論的私信我吧 |
5樓2023-09-01 09:04:58
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