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Limax-Tang新蟲 (正式寫手)
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[求助]
同源重組(無縫克隆)做不出來,求解決/改進方案。 已有2人參與
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在上海華東理工的實驗室做同源重組效果很好,基本都比較容易的能挑出陽性克隆;但同樣的實驗在杭州浙江工業(yè)大學的實驗室做卻結果很差,不知道有沒有經歷過類似情況的同志提出寶貴的建議!萬分感激!希望大家能多多交流~ 另外重組酶是上海翊圣的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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我們實驗室之前用的也是圣羽的,用著用著就做不出來了,后來換了諾唯贊的就好了,我構建到了9200bp片段+5000的pcdna3.1,但是現(xiàn)在最近一個月,我用諾唯贊死活做不出來。。。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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同樣的經歷對于搞科研都應該遇見不少,不過樓主之前已有成功經驗,實驗流程上應該沒有大的問題,可能要細細擼一遍實驗流程才能找到問題,我之前也經常做同源重組,SLIC,Gibson組裝都試過,公司的kit也用過不少,遇見不成功的最可能的問題就是擴的不好或者同源臂有問題,仔細檢查下沒有問題的話,可以考慮先買公司的kit做,安利genscript的genbuilder還可以,畢竟實驗不等人,原因可以慢慢找。祝好。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

鐵蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)

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