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Newfish1鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
在大腸桿菌中異源表達(dá)酵母基因是否需要密碼子優(yōu)化 已有1人參與
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如題， 1.酵母基因表達(dá)系統(tǒng)和大腸有差異，那么異源表達(dá)其基因是否需要優(yōu)化 2.該基因5000bp左右，選擇什么啟動(dòng)子比較合適 3.普遍來(lái)說(shuō)，異源表達(dá)某基因還需要注意什么 感謝解答，千恩萬(wàn)謝！ |
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2樓2019-06-14 19:10:16
3樓2019-06-14 23:59:27
sannny
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-06-15 22:29:06
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-06-15 22:29:06
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鑒于序列太長(zhǎng)，合成成本比較高，建議先擴(kuò)增目的基因做表達(dá)，現(xiàn)在可以補(bǔ)充稀有密碼子的表達(dá)菌挺多的。另外就像樓上說(shuō)的，蛋白太大，可能表達(dá)有困難，但也不是額絕對(duì)的，總歸要試試。做蛋白表達(dá)，千萬(wàn)不要預(yù)設(shè)立場(chǎng)，比如哪個(gè)啟動(dòng)子更好，要不要優(yōu)化之類的。合理的做法是不同的啟動(dòng)子，不同的標(biāo)簽的表達(dá)系統(tǒng)同時(shí)做。而不言先做一個(gè)，不行，換下一個(gè)。不然時(shí)間成本是很高的。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2019-06-15 08:02:05
xinxiyuzhou
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5樓2019-06-15 09:10:56
Newfish1
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6樓2019-06-15 12:40:22
Newfish1
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異源表達(dá)是代謝工程的常用手段吧，一來(lái)可以讓基因表達(dá)不受宿主控制，二來(lái)很大可能性降低反饋抑制 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
7樓2019-06-15 12:44:55
sannny
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比如BL21（DE3）codonplus 比如Rosetta gami B 樓里有人說(shuō)了啊，既然是酵母的蛋白，完全可以用畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)做啊。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2019-06-15 15:08:14
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