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無(wú)奈被逼科研新蟲(chóng) (小有名氣)
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熒光定量PCR疑惑解答 已有1人參與
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普通PCR驗(yàn)證引物,跑電泳,目的條帶還挺清晰的,引物二聚體也不是很明顯。然后選擇其中比較理想的條帶對(duì)應(yīng)的溫度,進(jìn)行熒光定量PCR,包括退火溫度,退火時(shí)間,延伸時(shí)間都是跟普通PCR條件完全一致。為啥熒光定量跑出來(lái)的曲線都不能完全符合要求呢?要么溶解曲線起峰效果不好,有不止兩個(gè)峰的。要么闊增效率的值偏離1很多。為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的問(wèn)題呢? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
鐵蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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