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零下8°新蟲 (小有名氣)
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[交流]
骨片免疫組化為什么脫蠟總是脫不干凈！ 已有1人參與
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親愛的蟲友們，我在做骨片的時(shí)候，免疫組化總是脫蠟脫不干凈，不論是免疫組化還是免疫熒光顯微鏡下都是蠟，抗體根本沒法結(jié)合，我嘗試了在二甲苯，一天，兩天，一個(gè)星期，兩個(gè)星期，二甲苯里水浴加熱兩周，一個(gè)月，都不能把蠟脫干凈，前期我已經(jīng)在烘箱將骨片烘烤四到六小時(shí)了，溫度大概55-60°。求大神不吝賜教�。� 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2019-05-24 22:05:52
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你所謂的骨片是否跟我們常用的HE或者免疫組化切片3-5微米厚度？如果是，你首先檢查或者換新的二甲苯�。�！其次，這個(gè)烤片的溫度一般60℃不能說55，大概不行，買個(gè)溫度對(duì)著烤箱頂部的孔或者直接放進(jìn)去把溫度一定調(diào)好，一般烤片1-2小時(shí)就可以，太久也不好。第三，二甲苯要2缸每缸時(shí)間要10分鐘左右，太短都不行。最后，二甲苯出來你的下行（濃度梯度遞減）酒精濃度時(shí)間有問題嗎？拍幾張圖片看看，更容易知道可能你的問題在哪里。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2019-05-26 07:05:42
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非常感謝您的指導(dǎo)，是這樣的，我們的骨片是脫鈣脫水包埋，然后就是切片，大概也就是3-5mm，我每次做的時(shí)候都是用的新的二甲苯，新的酒精，酒精也是按照濃度梯度來的，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室的烘箱溫度無法進(jìn)行精確控制，所以我說成55～60°，，我們醫(yī)院的病理科給我們切的片子，他們給我做了幾張HE染色片子，可以看到骨片的細(xì)胞，但是免疫組化，熒光抗體無法結(jié)合！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2019-05-26 08:30:27
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