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張章一新蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)胞凍存的具體操作步驟 已有2人參與
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細(xì)胞凍存具體操作步驟 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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木蟲 (著名寫手)
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2樓2019-05-18 11:06:23
Flyme508
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【答案】應(yīng)助回帖
| 將所需的完全培養(yǎng)基放在培養(yǎng)室室溫預(yù)熱30min后開始復(fù)蘇。復(fù)蘇步驟：先準(zhǔn)備37度溫水，將細(xì)胞從液氮罐取出，觀察管內(nèi)無液氮的情況下，捏住管蓋，將細(xì)胞凍存部分浸入溫水輕輕搖晃，一分鐘左右細(xì)胞將會(huì)融化。融化完全后立即終止水浴，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力100g(約900rpm)左右，1min為宜，不同離心機(jī)會(huì)有差異。離心完成后，棄凍存液，用剛才預(yù)熱的培養(yǎng)基緩慢加入凍存管，并輕柔重懸細(xì)胞后接種至T25或者10cm皿中。顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照留存，第二天再觀察細(xì)胞。要求整個(gè)復(fù)蘇過程時(shí)長不超過5min，吹打細(xì)胞盡量輕柔，且不能有大量氣泡。 |
3樓2019-05-23 10:51:06
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